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常用蛋白质纯化缓冲液有哪些(蛋白质分离纯化的方法及原理)

2021-11-22 11:29:11 废气处理设备 浏览数:4291

蛋白质的结构和功能需要在合适的pH值环境中才能维持,因此在蛋白的制备及纯化过程中,生物缓冲液的选择非常重要,只有合适的缓冲液才能保证蛋白的活性和结构稳定。

蛋白纯化过程缓冲液作用

用于蛋白纯化的缓冲剂有很多种,在维持体系的pH同时,要保证蛋白在纯化过程中不能失活,或者是尽量减少蛋白失活的量,在蛋白纯化的每一个步骤中都要保持蛋白的可溶性和活性。

蛋白纯化缓冲液要求

蛋白纯化过程中的缓冲液既要防止蛋白降解,也要防止蛋白聚合,其对实验结果影响显着。在选择和试剂缓冲液时应考虑以下几个因素:pH值、缓冲体系、盐离子、还原剂和稳定剂。废气处理设备其中每一个因素都要根据所纯化的目标蛋白进行优化,并以目标蛋白的活性作为优化的评估标准。

了解蛋白稳定性条件

蛋白的种类很多,不同的蛋白适应的pH值有差异,需根据其最适pH值来选择缓冲液。很多时候采用的是pH是7.4,这是模仿的生物条件,大多数蛋白在这个pH值下是稳定的。不过也有一些是例外的,这就需要调整pH值,以保持蛋白是可溶的且不会降解。常用蛋白质纯化缓冲液有哪些

蛋白纯化常用的缓冲剂

蛋白纯化过程中常用的缓冲液有Tris、Tricine、Bis-Tris、MOPS等,其中普遍的是用Tris,它的缓冲范围接近生理pH值,且有着较低的离子强度,是蛋白质的良好溶剂,能保证蛋白的稳定性。需注意的是配制缓冲液时,尽量避开目标蛋白的等电点pl。因为蛋白在其等电点的pH溶液中表面没有静电荷,带百分子间排斥力减小,容易聚集,溶解度降低。

现在需纯化的蛋白的适应pH值、等电点、以及缓冲液的缓冲范围都是可以查到的,直接按对应要求匹配即可

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